• sinn

Nucleus pulposus autologous air a chuir a-steach do chnàmh lumbar subchondral gus modal beathach de dh’ atharrachaidhean Modic a chruthachadh

Tapadh leibh airson tadhal air Nature.com. Chan eil ach beagan taic CSS aig an tionndadh brobhsair a tha thu a’ cleachdadh. Airson na builean as fheàrr, tha sinn a’ moladh brobhsair nas ùire a chleachdadh (no modh co-chòrdalachd a dhì-chomasachadh ann an Internet Explorer). Anns an eadar-ama, gus dèanamh cinnteach à taic leantainneach, seallaidh sinn an làrach gun stoidhlichean agus JavaScript.
Tha stèidheachadh mhodalan beathach de atharrachadh modic (MC) na bhunait chudromach airson sgrùdadh MC. Chaidh leth-cheud sa ceithir rabaidean geala Sealan Nuadh a roinn ann am buidheann gnìomhachd sham, buidheann cuir a-steach fèithean (buidheann ME) agus buidheann cuir a-steach niuclas pulposus (buidheann NPE). Anns a ’bhuidheann NPE, chaidh an diosc eadar-dhruim-altachain a nochdadh le dòigh-obrach lannsa lumbar anterolateral agus chaidh snàthad a chleachdadh gus corp vertebral L5 a bhualadh faisg air a’ phlàta deiridh. Chaidh NP a thoirt a-mach às an diosc intervertebral L1 / 2 le steallaire agus a thoirt a-steach dha. A 'drileadh toll anns a' chnàimh subchondral. Bha na modhan lannsaireachd agus modhan drileadh anns a 'bhuidheann cuir a-steach fèithean agus a' bhuidheann gnìomhachd sham an aon rud ris an fheadhainn anns a 'bhuidheann cuir a-steach NP. Anns a 'bhuidheann ME, chaidh pìos fèithe a chuir a-steach don toll, agus anns a' bhuidheann gnìomhachd sham, cha deach dad a chuir a-steach don toll. Às deidh an obair-lannsa, chaidh sganadh MRI agus deuchainn bith-eòlasach moileciuil a dhèanamh. Dh'atharraich an comharra anns a 'bhuidheann NPE, ach cha robh atharrachadh comharra follaiseach anns a' bhuidheann sham-operation agus a 'bhuidheann ME. Sheall sgrùdadh eachdraidheil gun deach iomadachadh clò neo-àbhaisteach fhaicinn aig an làrach cuir a-steach, agus chaidh an abairt IL-4, IL-17 agus IFN-γ a mheudachadh anns a’ bhuidheann NPE. Faodaidh cuir a-steach NP a-steach don chnàmh subchondral modal beathach de MC a chruthachadh.
Tha atharrachaidhean modic (MC) nan lotan de na clàran-crìochnachaidh vertebral agus an smior cnàimh faisg air làimh a chithear air ìomhaigh ath-shuidheachadh magnetach (MRI). Tha iad gu math cumanta ann an daoine fa leth le comharraidhean co-cheangailte1. Tha mòran sgrùdaidhean air cuideam a chuir air cho cudromach sa tha MC mar thoradh air a cheangal ri pian ìseal air ais (LBP) 2,3. Thug de Roos et al.4 agus Modic et al.5 cunntas neo-eisimeileach an-toiseach air trì seòrsachan eadar-dhealaichte de neo-riaghailteachdan comharran subchondral anns an smior cnàimh droma. Tha atharrachaidhean modic seòrsa I hypointense air sreathan le cuideam T1 (T1W) agus hyperintense air sreathan le cuideam T2 (T2W). Tha an lesion seo a’ nochdadh clàran-crìochnachaidh fissure agus clò granulation falamh faisg air làimh anns an smior cnàimh. Tha atharrachaidhean modic seòrsa II a’ nochdadh comharra àrd air gach cuid sreathan T1W agus T2W. Anns an t-seòrsa seo de lesion, lorgar sgrios endplate, a bharrachd air ath-chur geir histological den smior cnàimh a tha faisg air làimh. Tha atharrachaidhean modic seòrsa III a’ nochdadh comharra ìosal ann an sreathan T1W agus T2W. Thathas air coimhead ri lotan sclerotic a tha co-chosmhail ris na clàran-crìochnachaidh6. Tha MC air a mheas mar ghalar pathological den spine agus tha dlùth cheangal aige ri mòran ghalaran degenerative den spine7,8,9.
A’ beachdachadh air an dàta a tha ri fhaighinn, tha grunn sgrùdaidhean air seallaidhean mionaideach a thoirt seachad air dòighean etiology agus pathological MC. Albert et al. mholainn gum faodadh MC a bhith air adhbhrachadh le herniation diosc8. Hu et al. air sgàth MC mar thoradh air fìor ìsleachadh diosc10. Mhol Kroc a’ bhun-bheachd de “briseadh diosc a-staigh,” a tha ag ràdh gum faodadh trauma diosc ath-aithris leantainn gu microtears anns a ’phlàta crìochnachaidh. Às deidh cruthachadh sgoltadh, faodaidh sgrios endplate leis an niuclas pulposus (NP) freagairt fèin-dìon a bhrosnachadh, a bheir tuilleadh air adhart gu leasachadh MC11. Ma et al. co-roinn sealladh coltach ris agus dh’ innis iad gu bheil prìomh àite aig fèin-dìon air a bhrosnachadh le NP ann am pathogenesis MC12.
Tha àite deatamach aig ceallan siostam dìonachd, gu sònraichte lymphocytes cuideachaidh CD4+ T, ann am pathogenesis fèin-dìon13. Bidh an fho-sheata Th17 a chaidh a lorg o chionn ghoirid a’ toirt a-mach an cytokine proinflammatory IL-17, a’ brosnachadh faireachdainn chemokine, agus a’ brosnachadh cheallan T ann am buill-bodhaig millte gus IFN-γ14 a thoirt gu buil. Tha àite sònraichte aig ceallan Th2 cuideachd ann am pathogenesis freagairtean dìon. Faodaidh cur an cèill IL-4 mar chealla Th2 riochdachail leantainn gu fìor bhuaidhean immunopathological15.
Ged a chaidh mòran de sgrùdaidhean clionaigeach a dhèanamh air MC16,17,18,19,20,21,22,23,24, tha fhathast gainnead de mhodalan deuchainneach bheathaichean iomchaidh a dh’ fhaodadh atharrais a dhèanamh air a’ phròiseas MC a bhios tric a’ tachairt ann an daoine agus a dh’ fhaodadh a bhith. air a chleachdadh gus sgrùdadh a dhèanamh air etiology no leigheasan ùra leithid leigheas cuimsichte. Gu ruige seo, cha deach aithris ach air beagan mhodalan beathach de MC gus sgrùdadh a dhèanamh air na h-innealan pathological bunaiteach.
Stèidhichte air an teòiridh fèin-dìon a mhol Albert agus Ma, stèidhich an sgrùdadh seo modal MC coineanach sìmplidh agus ath-ghinte le bhith a’ tar-chuir NP gu fèin-ghluasadach faisg air a’ phlàta deiridh drileadh. Is e amasan eile a bhith a’ cumail sùil air feartan eachdraidheil nam modalan beathach agus a’ measadh uidheamachdan sònraichte NP ann an leasachadh MC. Chun na crìche seo, bidh sinn a’ cleachdadh dhòighean leithid bith-eòlas moileciuil, MRI, agus sgrùdaidhean histological gus adhartas MC a sgrùdadh.
Bhàsaich dà choineanaich le bhith a 'bleith rè obair-lannsa, agus bhàsaich ceithir coineanaich rè anesthesia rè MRI. Mhair na 48 coineanaich a bha air fhàgail agus cha do sheall iad comharran giùlain no eanchainn às deidh obair-lannsa.
Tha MRI a’ sealltainn gu bheil dian chomharran an stuth freumhaichte ann an diofar thuill eadar-dhealaichte. Dh'atharraich dian comharra corp vertebral L5 anns a 'bhuidheann NPE mean air mhean aig 12, 16 agus 20 seachdainean an dèidh a chuir a-steach (thaisbean sreath T1W comharra ìseal, agus sheall sreath T2W comharra measgaichte agus comharra ìseal) (Fig. 1C), fhad' sa bha an MRI a 'nochdadh den dà bhuidheann eile de phàirtean freumhaichte fhathast an ìre mhath seasmhach san aon ùine (Fig. 1A, B).
(A) MRIan sreath riochdachail den spine lumbar coineanach aig 3 puingean ùine. Cha deach mì-riaghailt sam bith a lorg anns na h-ìomhaighean den bhuidheann gnìomhachd sham. (B) Tha feartan comharran a’ chuirp vertebral anns a ’bhuidheann ME coltach ris an fheadhainn anns a’ bhuidheann gnìomhachd sham, agus chan eilear a ’faicinn atharrachadh comharra cudromach aig an làrach in-ghabhail thar ùine. (C) Ann am buidheann NPE, tha an comharra ìosal ri fhaicinn gu soilleir anns an t-sreath T1W, agus tha an comharra measgaichte agus an comharra ìosal rim faicinn gu soilleir anns an t-sreath T2W. Bhon ùine 12-seachdain chun na h-ùine 20-seachdain, bidh na comharran àrda bho àm gu àm timcheall nan comharran ìosal ann an sreath T2W a’ dol sìos.
Chithear hyperplasia cnàimh follaiseach aig làrach cuir a-steach a’ chuirp vertebral anns a’ bhuidheann NPE, agus tha an hyperplasia cnàimh a’ tachairt nas luaithe bho 12 gu 20 seachdainean (Fig. 2C) an coimeas ris a’ bhuidheann NPE, chan eilear a’ faicinn atharrachadh mòr anns a’ mhodail vertebral. cuirp; Buidheann Sham agus buidheann ME (Fig. 2C) 2A, B).
(A) Tha uachdar a’ chuirp vertebral aig a’ chuibhreann a chaidh a chuir a-steach gu math rèidh, bidh an toll a’ slànachadh gu math, agus chan eil hyperplasia anns a’ bhodhaig vertebral. (B) Tha cumadh na làraich a chaidh a chuir a-steach anns a’ bhuidheann ME coltach ris an fhear anns a’ bhuidheann obrachaidh sham, agus chan eil atharrachadh follaiseach ann an coltas na làraich implant thar ùine. (C) Thachair hyperplasia cnàimh aig an làrach a chaidh a chuir a-steach sa bhuidheann NPE. Mheudaich an hyperplasia cnàimh gu luath agus eadhon air a leudachadh tron ​​​​diosg eadar-dhruim-altachain chun a’ bhodhaig vertebral contralateral.
Tha mion-sgrùdadh eachdraidheil a 'toirt seachad fiosrachadh nas mionaidiche mu bhith a' cruthachadh chnàmhan. Tha Figear 3 a’ sealltainn nan dealbhan de na h-earrannan postoperative air an dath le H&E. Anns a 'bhuidheann gnìomhachd sham, bha na chondrocytes air an deagh rèiteachadh agus cha deach iomadachadh cealla a lorg (Fig. 3A). Bha an suidheachadh anns a 'bhuidheann ME coltach ris an fhear anns a' bhuidheann sham-operation (Fig. 3B). Ach, anns a 'bhuidheann NPE, chaidh àireamh mhòr de chondrocytes agus iomadachadh de cheallan coltach ri NP fhaicinn aig an làrach implant (Fig. 3C);
(A) Chithear trabeculae faisg air a’ phlàta deiridh, tha na chondrocytes air an rèiteachadh gu grinn le meud agus cumadh cealla èideadh agus gun iomadachadh (40 uair). (B) Tha suidheachadh an làraich in-ghabhail anns a’ bhuidheann ME coltach ri suidheachadh na buidhne sham. Chithear trabeculae agus chondrocytes, ach chan eil iomadachadh follaiseach aig an làrach implant (40 uair). (B) Chithear gu bheil chondrocytes agus ceallan coltach ri NP a’ dol am meud gu mòr, agus tha cumadh agus meud chondrocytes neo-chòmhnard (40 uair).
Chaidh an abairt de interleukin 4 (IL-4) mRNA, interleukin 17 (IL-17) mRNA, agus interferon γ (IFN-γ) mRNA fhaicinn anns gach cuid na buidhnean NPE agus ME. Nuair a chaidh coimeas a dhèanamh eadar ìrean faireachdainn de ghinean targaid, chaidh na h-abairtean gine de IL-4, IL-17, agus IFN-γ àrdachadh gu mòr anns a’ bhuidheann NPE an coimeas ri ìrean na buidhne ME agus a’ bhuidheann obrachaidh sham (Fig. 4). (P <0.05). An coimeas ris a’ bhuidheann obrachaidh sham, cha do mheudaich ìrean faireachdainn IL-4, IL-17, agus IFN-γ anns a’ bhuidheann ME ach beagan agus cha do ràinig iad atharrachadh staitistigeil (P> 0.05).
Sheall an abairt mRNA de IL-4, IL-17 agus IFN-γ anns a’ bhuidheann NPE gluasad gu math nas àirde na an fheadhainn anns a’ bhuidheann obrachaidh sham agus a’ bhuidheann ME (P <0.05).
An coimeas ri sin, cha do sheall na h-ìrean faireachdainn anns a’ bhuidheann ME eadar-dhealachadh mòr sam bith (P> 0.05).
Chaidh mion-sgrùdadh blot an iar a dhèanamh a’ cleachdadh antibodies a bha rim faighinn gu malairteach an aghaidh IL-4 agus IL-17 gus am pàtran abairt mRNA atharraichte a dhearbhadh. Mar a chithear ann am Figearan 5A, B, an coimeas ris a’ bhuidheann ME agus a’ bhuidheann obrachaidh sham, chaidh ìrean pròtain IL-4 agus IL-17 anns a’ bhuidheann NPE àrdachadh gu mòr (P <0.05). An coimeas ris a’ bhuidheann obrachaidh sham, cha do shoirbhich leis na h-ìrean pròtain IL-4 agus IL-17 anns a’ bhuidheann ME atharrachaidhean cudromach gu staitistigeil a ruighinn (P> 0.05).
(A) Bha ìrean pròtain IL-4 agus IL-17 anns a’ bhuidheann NPE gu math nas àirde na an fheadhainn anns a’ bhuidheann ME agus buidheann placebo (P <0.05). (B) Histogram blot an iar.
Mar thoradh air an àireamh bheag de shamhlaichean daonna a gheibhear rè obair-lannsa, tha sgrùdaidhean soilleir agus mionaideach air pathogenesis MC rudeigin duilich. Dh’ fheuch sinn ri modal beathach de MC a stèidheachadh gus sgrùdadh a dhèanamh air na dòighean pathological a dh’ fhaodadh a bhith ann. Aig an aon àm, chaidh measadh rèididheachd, measadh histological agus measadh bith-eòlasach moileciuil a chleachdadh gus cùrsa MC a leantainn le NP autograft. Mar thoradh air an sin, dh’ adhbhraich modal cuir a-steach NP atharrachadh mean air mhean ann an dian chomharran bho 12-seachdain gu puingean ùine 20-seachdain (comharra ìosal measgaichte ann an sreathan T1W agus comharra ìosal ann an sreathan T2W), a’ nochdadh atharrachaidhean clò, agus an eachdraidh agus moileciuil. dhearbh measaidhean bith-eòlasach toraidhean an sgrùdaidh rèididheachd.
Tha toraidhean an deuchainn seo a 'sealltainn gun do thachair atharrachaidhean lèirsinneach agus eachdraidheil aig làrach briseadh corp vertebral anns a' bhuidheann NPE. Aig an aon àm, chaidh an abairt de ghinean IL-4, IL-17 agus IFN-γ, a bharrachd air IL-4, IL-17 agus IFN-γ a choimhead, a’ nochdadh gun deach briseadh air clò niuclas fèin-ghluasadach pulposus anns an vertebral. faodaidh an corp sreath de chomharran agus atharrachaidhean morphologach adhbhrachadh. Tha e furasta faighinn a-mach gu bheil feartan comharran cuirp vertebral a’ mhodail ainmhidh (comharra ìosal ann an sreath T1W, comharra measgaichte agus comharra ìosal anns an t-sreath T2W) glè choltach ris an fheadhainn aig ceallan vertebral daonna, agus na feartan MRI cuideachd dearbhaich na beachdan air histology agus làn anatomy, is e sin, tha na h-atharrachaidhean ann an ceallan corp vertebral adhartach. Ged a dh’ fhaodadh am freagairt sèidteach a dh’ adhbhraich trauma gann nochdadh goirid às deidh puncture, sheall toraidhean MRI gun do nochd atharrachaidhean comharran a bha a’ sìor fhàs 12 seachdainean às deidh puncture agus lean iad suas ri 20 seachdainean gun chomharran sam bith air faighinn seachad air no tionndadh air ais atharrachaidhean MRI. Tha na co-dhùnaidhean sin a’ moladh gu bheil NP vertebral fèin-obrachail na dhòigh earbsach airson MV adhartach a stèidheachadh ann an coineanaich.
Feumaidh am modail puncture seo sgil, ùine, agus oidhirp lannsaireachd iomchaidh. Ann an deuchainnean tòiseachaidh, faodaidh sgaradh no cus brosnachaidh de na structaran paravertebral ligamentous leantainn gu cruthachadh osteophytes vertebral. Bu chòir a bhith faiceallach gun a bhith a’ milleadh no a’ cur dragh air na diosgan a tha faisg air làimh. Leis gu feumar smachd a chumail air doimhneachd an t-slighe a-steach gus toraidhean cunbhalach agus ath-riochdachadh fhaighinn, rinn sinn plug le làimh le bhith a ’gearradh dheth an t-snàthad de shnàthaid 3 mm a dh’ fhaid. Le bhith a’ cleachdadh a’ phluga seo nì sin cinnteach gu bheil doimhneachd drileadh èideadh anns a’ bhodhaig vertebral. Ann an deuchainnean tòiseachaidh, lorg triùir lannsairean orthopédic a bha an sàs san obair-lannsa snàthadan 16-tomhais nas fhasa obrachadh le snàthadan 18-tomhais no dòighean eile. Gus cus sèididh a sheachnadh rè drileadh, le bhith a’ cumail an t-snàthad fhathast airson greiseag bheir sin toll cuir a-steach nas freagarraiche, a’ moladh gum faodar smachd a chumail air ìre sònraichte de MC san dòigh seo.
Ged a tha mòran sgrùdaidhean air MC a chuimseachadh, chan eil mòran fios againn mu etiology agus pathogenesis MC25,26,27. Stèidhichte air na sgrùdaidhean a rinn sinn roimhe, lorg sinn gu bheil prìomh àite aig autoimmunity ann an tachartas agus leasachadh MC12. Rinn an sgrùdadh seo sgrùdadh air an abairt cainneachdail de IL-4, IL-17, agus IFN-γ, a tha nam prìomh shlighean eadar-dhealachaidh de cheallan CD4 + às deidh brosnachadh antigen. Anns an sgrùdadh againn, an coimeas ris a’ bhuidheann àicheil, bha faireachdainn nas àirde aig a’ bhuidheann NPE de IL-4, IL-17, agus IFN-γ, agus bha ìrean pròtain IL-4 agus IL-17 cuideachd nas àirde.
Gu clionaigeach, tha abairt IL-17 mRNA air a mheudachadh ann an ceallan NP bho euslaintich le herniation diosc28. Chaidh ìrean faireachdainn àrdaichte IL-4 agus IFN-γ a lorg cuideachd ann am modal herniation diosc neo-dhrùidhteach dian an coimeas ri smachdan fallain29. Tha prìomh àite aig IL-17 ann an sèid, leòn clò ann an galairean fèin-dìon30 agus a’ neartachadh freagairt dìon do IFN-γ31. Thathas air aithris gu bheil leòn clò leasaichte IL-17 ann an luchagan MRL / lpr32 agus luchagan a tha buailteach do autoimmunity33. Faodaidh IL-4 bacadh a chur air a bhith a 'cur an cèill cytokines proinflammatory (leithid IL-1β agus TNFα) agus gnìomhachd macrophage34. Chaidh aithris gu robh an abairt mRNA de IL-4 eadar-dhealaichte anns a’ bhuidheann NPE an coimeas ri IL-17 agus IFN-γ aig an aon àm; Bha an abairt mRNA de IFN-γ anns a’ bhuidheann NPE gu math nas àirde na anns na buidhnean eile. Mar sin, dh’ fhaodadh cinneasachadh IFN-γ a bhith na eadar-mheadhanair den fhreagairt shèideach a dh’ adhbharaicheas eadar-luachadh NP. Tha sgrùdaidhean air sealltainn gu bheil IFN-γ air a thoirt a-mach le iomadh seòrsa cealla, a’ toirt a-steach ceallan T cuideachaidh seòrsa 1 gnìomhaichte, ceallan marbhadh nàdurrach, agus macrophages35,36, agus tha e na phrìomh cytokine pro-inflammatory a bhrosnaicheas freagairtean dìon37.
Tha an sgrùdadh seo a’ moladh gum faodadh freagairt fèin-dìon a bhith an sàs ann an tachartas agus leasachadh MC. Luoma et al. lorg gu bheil feartan comharran MC agus NP follaiseach coltach ri MRI, agus tha an dà chuid a’ nochdadh comharra àrd ann an sreath T2W38. Thathas air dearbhadh gu bheil dlùth cheangal aig cuid de cytokines ri tachartas MC, leithid IL-139. Ma et al. moladh gum faodadh buaidh mhòr a bhith aig sruthadh suas no sìos NP air tachairt agus leasachadh MC12. Dh'aithris Bobechko40 agus Herzbein et al.41 gur e inneal immunotolerant a th’ ann an NP nach urrainn a dhol a-steach don cuairteachadh falaisgeach bho àm breith. Bidh toradh NP a’ toirt a-steach buidhnean cèin a-steach don t-solar fala, agus mar sin a’ toirt buaidh air ath-bheachdan fèin-dìon ionadail42. Faodaidh ath-bhualaidhean autoimmune àireamh mhòr de fhactaran dìon adhbhrachadh, agus nuair a tha na factaran sin fosgailte gu leantainneach do fhigheagan, faodaidh iad atharrachaidhean adhbhrachadh ann an comharran43. Anns an sgrùdadh seo, tha cus cuideam de IL-4, IL-17 agus IFN-γ nam factaran dìon àbhaisteach, a’ dearbhadh tuilleadh an dàimh dlùth eadar NP agus MCs44. Tha am modail beathach seo gu math coltach ri briseadh NP agus faighinn a-steach don truinnsear deiridh. Nochd am pròiseas seo tuilleadh buaidh fèin-dìon air MC.
Mar a bhiodh dùil, tha am modail beathach seo a’ toirt dhuinn àrd-ùrlar a dh’ fhaodadh a bhith againn airson sgrùdadh a dhèanamh air MC. Ach, tha cuid de chuingealachaidhean fhathast aig a’ mhodail seo: an toiseach, aig ìre amharc bheathaichean, feumar cuid de choineanaich ìre eadar-mheadhanach a bhith air an euthanachadh airson deuchainn bith-eòlas eachdraidheil agus moileciuil, gus am bi cuid de bheathaichean “a’ tuiteam a-mach à cleachdadh ”thar ùine. San dàrna h-àite, ged a tha trì puingean ùine air an suidheachadh san sgrùdadh seo, gu mì-fhortanach, cha do mhodail sinn ach aon sheòrsa MC (Modic seòrsa I change), agus mar sin chan eil e gu leòr airson pròiseas leasachadh galair daonna a riochdachadh, agus feumar barrachd phuingean ùine a shuidheachadh. coimhead nas fheàrr air na h-atharrachaidhean comharran gu lèir. San treas àite, faodaidh na h-atharrachaidhean ann an structar clò a bhith air an sealltainn gu soilleir le staining histological, ach faodaidh cuid de dhòighean sònraichte nochdadh nas fheàrr air na h-atharrachaidhean microstructural sa mhodail seo. Mar eisimpleir, chaidh microscopaidh solais polarized a chleachdadh gus sgrùdadh a dhèanamh air cruthachadh fibrocartilage ann an diosgan intervertebral coineanach45. Feumaidh buaidhean fad-ùine NP air MC agus endplate tuilleadh sgrùdaidh.
Chaidh leth-cheud sa ceithir coineanaich geal Sealainn Nuadh (cuideam timcheall air 2.5-3 kg, aois 3-3.5 mìosan) a roinn air thuaiream ann am buidheann obrachaidh sham, buidheann cuir a-steach fèithean (buidheann ME) agus buidheann cuir a-steach freumh nerve (buidheann NPE). Chaidh a h-uile modh deuchainneach aontachadh le Comataidh Beusachd Ospadal Tianjin, agus chaidh na modhan deuchainneach a dhèanamh a rèir an stiùireadh aontaichte.
Chaidh cuid de leasachaidhean a dhèanamh air dòigh-lannsa S. Sobajima 46 . Chaidh a h-uile coineanach a chuir ann an suidheachadh taobh thall agus chaidh an uachdar roimhe de chòig dioscan eadar-dhruim-altachain lumbar leantainneach (IVDs) a nochdadh le bhith a 'cleachdadh dòigh-obrach posterolateral retroperitoneal. Chaidh anesthesia coitcheann a thoirt do gach coineanach (20% urethane, 5 ml / kg tron ​​vein cluais). Chaidh gearradh craiceann fad-ùine a dhèanamh bho oir ìosal na h-asnagan gu oir pelvic, 2 cm ventral gu na fèithean paravertebral. Bha an cnàimh-droma ceart anterolateral bho L1 gu L6 air a nochdadh le bhith a 'sgaradh geur agus sgiobalta de na h-innealan subcutaneous os cionn, clò retroperitoneal, agus fèithean (Fig. 6A). Chaidh an ìre diosc a dhearbhadh le bhith a’ cleachdadh a’ bhrim pelvic mar chomharra-tìre anatomical airson ìre diosc L5-L6. Cleachd snàthad puncture 16-tomhais gus toll a dhrileadh faisg air truinnsear deiridh an vertebra L5 gu doimhneachd 3 mm (Fig. 6B). Cleachd steallaire 5-ml gus a bhith ag amas air an niuclas autologous pulposus anns an diosc intervertebral L1-L2 (Fig. 6C). Thoir air falbh an niuclas pulposus no fèithe a rèir riatanasan gach buidheann. Às deidh an toll drile a dhoimhneachadh, thèid suaicheantais so-ruigsinneach a chuir air an fascia domhainn, fascia uachdarach agus craiceann, a ’gabhail cùram gun a bhith a’ dèanamh cron air maothran periosteal na bodhaig vertebral rè obair-lannsa.
(A) Tha an diosc L5-L6 fosgailte tro dhòigh-obrach posterolateral retroperitoneal. (B) Cleachd snàthad 16-tomhais gus toll a dhrileadh faisg air clàr-crìochnachaidh L5. (C) Bithear a’ buain MF fèin-fhillte.
Chaidh anesthesia coitcheann a thoirt seachad le 20% urethane (5 ml / kg) air a rianachd tron ​​​​fheòil cluais, agus chaidh radiographs spine lumbar ath-aithris aig seachdainean 12, 16, agus 20 postoperative.
Chaidh coineanaich a thoirt seachad le in-stealladh intramuscular de ketamine (25.0 mg / kg) agus sodium pentobarbital intravenous (1.2 g / kg) aig seachdainean 12, 16 agus 20 às deidh lannsaireachd. Chaidh an cnàimh-droma gu lèir a thoirt air falbh airson mion-sgrùdadh histological agus chaidh fìor sgrùdadh a dhèanamh. Chaidh tar-sgrìobhadh cainneachdail air ais (RT-qPCR) agus blotting an Iar a chleachdadh gus atharrachaidhean ann am factaran dìon a lorg.
Chaidh deuchainnean MRI a dhèanamh ann an coineanaich a’ cleachdadh inneal clionaigeach 3.0 T (GE Medical Systems, Florence, SC) uidheamaichte le inneal-glacaidh coil ball orthogonal. Chaidh coineanaich anesthetized le 20% urethane (5 mL / kg) tron ​​vein cluais agus an uairsin chuir iad supine taobh a-staigh an magnet leis an roinn lumbar stèidhichte air coil uachdar cruinn le trast-thomhas 5-òirleach (GE Medical Systems). Chaidh ìomhaighean ionadail le cuideam coronal T2 (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) fhaighinn gus suidheachadh an diosc lumbar a mhìneachadh bho L3 - L4 gu L5 - L6. Chaidh sliseagan le cuideam T2 plèana sagittal fhaighinn leis na roghainnean a leanas: sreath luath spin-echo le ùine ath-aithris (TR) de 2200 ms agus àm mac-talla (TE) de 70 ms, matrix; raon lèirsinneach de 260 agus ochd brosnachaidhean; B 'e an tighead gearraidh 2 mm, b' e am beàrn 0.2 mm.
Às deidh an dealbh mu dheireadh a thogail agus an coineanach mu dheireadh a mharbhadh, chaidh na diosgan sham, freumhaichte le fèithean, agus NP a thoirt air falbh airson sgrùdadh eachdraidheil. Chaidh figheagan a shuidheachadh ann am formalin buffered neodrach 10% airson seachdain 1, air a dhì-calcachadh le searbhag ethylenediaminetetraacetic, agus paraffin air a roinn. Bha blocaichean clò air an stèidheachadh ann am paraffin agus air an gearradh ann an earrannan sagittal (5 μm de thighead) a’ cleachdadh microtome. Bha earrannan air an dath le hematoxylin agus eosin (H&E).
Às deidh dhaibh na diosgan eadar-dhruim-altachain a chruinneachadh bho na coineanaich anns gach buidheann, chaidh RNA iomlan a thoirt a-mach le bhith a’ cleachdadh colbh UNIQ-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., Sìona) a rèir stiùireadh an neach-dèanamh agus siostam tar-sgrìobhaidh cùil ImProm II (Promega Inc. , Madison, WI, USA). Chaidh tar-sgrìobhadh cùil a dhèanamh.
Chaidh RT-qPCR a dhèanamh a’ cleachdadh Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., USA) agus SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) a rèir stiùireadh an neach-dèanamh. B’ e meud freagairt PCR 20 μl agus bha 1.5 μl de cDNA caolaichte agus 0.2 μM de gach primer ann. Chaidh primers a dhealbhadh le OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA) agus an dèanamh le Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (Sìona) (Clàr 1). Chaidh na cumhaichean rothaireachd teirmeach a leanas a chleachdadh: ceum gnìomhachaidh polymerase tùsail aig 94 ° C airson 2 min, an uairsin 40 cearcallan de 15 s gach fear aig 94 ° C airson dì-nàdarachadh teamplaid, annealing airson 1 min aig 60 ° C, leudachadh, agus fluorescence. Chaidh tomhasan a dhèanamh airson 1 mionaid aig 72 ° C. Chaidh a h-uile sampall a mheudachadh trì tursan agus chaidh an luach cuibheasach a chleachdadh airson mion-sgrùdadh RT-qPCR. Chaidh dàta leudachaidh a sgrùdadh a’ cleachdadh FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA). Chaidh abairt gine IL-4, IL-17, agus IFN-γ a dhèanamh àbhaisteach don smachd endogenous (ACTB). Chaidh ìrean faireachdainn coimeasach de mRNA targaid a thomhas a’ cleachdadh an dòigh 2-ΔΔCT.
Chaidh pròtain iomlan a thoirt a-mach à clò a’ cleachdadh homogenizer clò ann am bufair lysis RIPA (anns a bheil protease agus cocktail inhibitor phosphatase) agus an uairsin centrifuged aig 13,000 rpm airson 20 min aig 4 ° C gus sprùilleach clò a thoirt air falbh. Chaidh leth-cheud microgram de phròtain a luchdachadh gach sreath, air a sgaradh le 10% SDS-PAGE, agus an uairsin a ghluasad gu membran PVDF. Chaidh bacadh a dhèanamh ann am bainne tioram neo-geir 5% ann an saline buffered Tris (TBS) anns a bheil 0.1% Tween 20 airson 1 h aig teòthachd an t-seòmair. Chaidh an membran a bhrosnachadh le antibody bun-sgoile an-aghaidh sgeadachadh coineanach (air a lagachadh 1:200; Boster, Wuhan, Sìona) (air a lagachadh 1:200; Bioss, Beijing, Sìona) thar oidhche aig 4 ° C agus fhreagair e air an dàrna latha; le antibody àrd-sgoile (immunoglobulin gobhar an-aghaidh coineanach G aig caolachadh 1: 40,000) còmhla ri horseradish peroxidase (Boster, Wuhan, Sìona) airson 1 uair aig teòthachd an t-seòmair. Chaidh comharran blot an iar a lorg le barrachd chemiluminescence air an membran chemiluminescent às deidh irradachadh X-ray. Airson mion-sgrùdadh densitometric, chaidh blots a sganadh agus a thomhas a’ cleachdadh bathar-bog BandScan agus chaidh na toraidhean a chuir an cèill mar a’ cho-mheas de immunoreactivity gine targaid ri immunoreactivity tubulin.
Chaidh àireamhachadh staitistigeil a dhèanamh a’ cleachdadh pasgan bathar-bog SPSS16.0 (SPSS, USA). Chaidh dàta a chaidh a chruinneachadh tron ​​​​sgrùdadh a chuir an cèill mar mheadhan ± claonadh àbhaisteach (meadhanach ± ​​SD) agus air a sgrùdadh le bhith a’ cleachdadh mion-sgrùdadh aon-shligheach air caochlaidhean (ANOVA) gus eadar-dhealachaidhean eadar an dà bhuidheann a dhearbhadh. Bhathar den bheachd gu robh P <0.05 cudromach gu staitistigeil.
Mar sin, dh’ fhaodadh stèidheachadh modal beathach de MC le bhith a’ toirt a-steach NPan fèin-fhillte a-steach don bhodhaig vertebral agus a’ coileanadh amharc macroanatomical, mion-sgrùdadh MRI, measadh histological agus mion-sgrùdadh bith-eòlasach moileciuil gu bhith na inneal cudromach airson measadh agus tuigse fhaighinn air uidheamachdan MC daonna agus leasachadh leigheasach ùr. eadraiginn.
Mar a bheir thu luaidh air an artaigil seo: Han, C. et al. Chaidh modal beathach de dh’ atharrachaidhean Modic a stèidheachadh le bhith a’ toirt a-steach pulposus nucleus autologous a-steach do chnàmh subchondral an spine lumbar. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., agus Boos, N. Ìomhaigh ath-shuidheachadh magnetach den spine lumbar: tricead herniation agus gleidheadh ​​​​diosg, teannachadh freumhan neoni, neo-riaghailtean plàta deiridh, agus osteoarthritis co-phàirteach ann an saor-thoilich asymptomatic . ìre. Raideòlas 209, 661–666, doi: 10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, agus Leboeuf-Eed, K. Atharraichean modic agus an dàimh aca ri toraidhean clionaigeach. European Spine Journal: foillseachadh oifigeil Comann Spine na h-Eòrpa, Comann Eòrpach Deformity Spinal, agus an Comann Eòrpach airson Rannsachadh Spine Cervical 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., et al. Atharrachaidhean modic anns na clàran-crìochnachaidh lumbar vertebral: tricead agus co-cheangal ri pian ìseal air ais agus sciatica ann an luchd-obrach fireann meadhan-aois. Spàin 32, 1116–1122, doi: 10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., agus Dalinka, M. MRI de smior cnàimh ag atharrachadh faisg air a’ phlàta deiridh ann an galair degenerative den spine lumbar. AJR. American Journal of Radiology 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ, agus Carter, JR Galar diosc degenerative: measadh air atharrachaidhean smior vertebral le MRI. Raideòlas 166, 193–199, doi: 10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS, agus Carter, JR Ìomhaigh de ghalar diosc degenerative. Raideòlas 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, et al. Bidh ro-innsearan de chlàr crìochnachaidh neovertebral (Modic) a’ comharrachadh atharrachaidhean anns an t-sluagh san fharsaingeachd. European Spine Journal: Foillseachadh Oifigeil Comann Spine na h-Eòrpa, an Comann Eòrpach airson Deformity Spinal, agus an Comann Eòrpach airson Rannsachadh Spine Cervical, Roinn 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB agus Mannisch, K. Atharraichean modic às deidh herniation diosc lumbar. European Spine Journal : Foillseachadh Oifigeil Comann Spine na h-Eòrpa, an Comann Eòrpach airson Deformity Spinal agus an Comann Eòrpach airson Rannsachadh Spine Cervical 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., agus Kaapa, E. Faodaidh atharrachaidhean seòrsa I modic ro-innse crìonadh diosc deformational adhartach gu luath: sgrùdadh 1-bliadhna san amharc. European Spine Journal 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ agus Fan, SW Atharrachaidhean modic: adhbharan a dh’ fhaodadh a bhith ann agus cur ri crìonadh diosc lumbar. Beachd-bharail Meidigeach 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Briseadh diosc a-staigh. Duilgheadasan le prolapse diosc thairis air 50 bliadhna. Spàin (Phila Pa 1976) 11, 650–653 (1986).


Ùine puist: Dùbhlachd-13-2024